Owner's manual

DS9477
Page 13
Uso previsto
Este sistema de detección es para uso diagnóstico in vitro.
ChromoPlex
1 Dual Detection es un sistema sin biotina de anticuerpos conjugados que se jan a la peroxidasa de rábano picante
(HRP) polimérica y a la fosfatasa alcalina (AP) para la detección de anticuerpos primarios de lgG de conejo y ratón unidos a tejidos. Se
utiliza para la tinción de secciones de tejido incluido en parana y jado con formol en el sistema automático BOND.
La interpretación clínica de cualquier tinción o de su ausencia deberá complementarse con estudios morfológicos. Se deben realizar
controles adecuados cuyos resultados deberá evaluar un patólogo cualicado en el contexto del historial clínico del paciente y de otras
pruebas diagnósticas.
El ChromoPlex 1 Dual Detection debe utilizarse conforme a unas prácticas de laboratorio adecuadas en relación al uso de controles de
tejidos. Para la vericación, los laboratorios deben teñir cada muestra de paciente junto con los controles positivo y negativo, además
de otros controles de tejidos especícos, según sea necesario.
Resumen y explicación
Las técnicas inmunohistoquímicas pueden utilizarse para detectar la presencia de antígenos en tejidos y células (véase “Uso de
Reactivos BOND” en la documentación del usuario de BOND).
ChromoPlex 1 Dual Detection utiliza una tecnología novedosa de polimerización controlada para preparar anticuerpos conjugados que
se jan a la AP y HRP polimérica. El sistema de detección evita el uso de estreptavidina y biotina, eliminando de esta forma la tinción no
especíca producida por la biotina endógena.
Este es el funcionamiento de ChromoPlex 1 Dual Detection:
Se incuba la muestra con peróxido de hidrógeno para anular la actividad de la peroxidasa endógena.
Se aplica un cóctel de anticuerpos primarios especícos de ratón y conejo suministrado por el usuario.
El reactivo Poli-HRP IgG localiza anticuerpos de ratón.
El reactivo Poli-AP IgG localiza anticuerpos de conejo.
Con el primer sustrato cromógeno 3,3’-tetraclorhidrato de diaminobencidina o (DAB) se visualizan los anticuerpos de ratón a través
de un precipitado marrón.
Con el segundo sustrato cromógeno (Fast Red), se visualizan los anticuerpos de conejo a través de un precipitado rojo.
La contratinción con hematoxilina (azul) permite la visualización de los núcleos celulares.
El uso combinado de ChromoPlex 1 Dual Detection con el sistema automático BOND reduce la posibilidad de aparición de errores
humanos y la variabilidad inherente derivada de la dilución del reactivo por separado, el pipeteo manual y la aplicación del reactivo.
Reactivos suministrados
Los reactivos suministrados son sucientes para 25 series de tinción BOND individuales, o un máximo de 100 portaobjetos.
Para conseguir un máximo de 100 portaobjetos a partir de este sistema de detección, estos se deben separar en grupos de 4 como
mínimo, por cada unidad de tinción de portaobjetos.
La separación en grupos inferiores a 4 dará lugar a menos portaobjetos teñidos.
Peroxide Block (15 mL) peróxido de hidrógeno al 3-4 %.1.
Polymer mHRP (15 mL) Poly-HRP antirratón que contiene suero animal al 10 % (v/v) en solución salina amortiguada con tris y 2.
ProClin
950 al 0,09 %.
Polymer rAP (15 mL) Poly-AP anticonejo que contiene suero animal al 10 % (v/v) en solución salina amortiguada con tris y ProClin 3.
950 al 0,09 %.
DAB Part 1 (2 mL) 3,3’-tetraclorhidrato de diaminobendidina 66 mM en solución estabilizante.4.
DAB Part B (35 mL) peróxido de hidrógeno ≤0,1 % (v/v) en solución estabilizante.5.
Red Part A (5.5 mL) activador con ProClin 950 al 0,5 %.6.
Red Part B (1.0 mL) sustrato.7.
Red Part C (1.0 mL) substrato.8.
Red Part D (35 mL) solución amortiguada con ProClin 950 al 0,5 %.9.
Hematoxylin DS9477 (15 mL) hematoxilina <0,1 %.10.
Dilución y mezcla
ChromoPlex 1 Dual Detection está optimizado para su empleo con el sistema BOND.
No es necesaria la reconstitución, mezcla, dilución o titulación de estos reactivos.
Material necesario pero no suministrado
Medios de montaje compatibles con ChromoPlex 1 Dual Detection (véase el apartado “Precauciones”).
Consulte al apartado “Utilización de reactivos BOND” de su documentación del usuario facilitada por BOND para obtener una lista
completa de los materiales necesarios para el tratamiento de las muestras y la tinción inmunohistoquímica cuando se utiliza el sistema
BOND.
ChromoPlex
1 Dual Detection for BOND
Catálogo Nº.: DS9477